紫外分光光度計利用的是樣品對紫外光的吸收能力不同的原理,以測量某一特定波長的紫外光波長能量發生吸收的程度。樣品的吸收特性與其分子結構有關,因此,紫外光譜可以用于分析樣品的化學結構以及其在制備和質控過程中的純度和質量。
紫外分光光度計主要由光源、單色器、待測樣品室、檢測器和計算機等五部分組成。
1、光源:它的光源通常采用一束高壓汞燈或者氘燈。
2、單色器:單色器的作用是選擇所需的波長范圍,以便用于測量。單色器通常由狹縫、光柵、反射鏡等部件組成,用于將白光分解成不同波長的光,并按需選擇出目標波長。
3、待測樣品室:待測樣品室是用于測量樣品吸收率的部分。它是一個光學容器,內部涂有黑色材料,以減小反射和散射。樣品通常放置在石英或者玻璃制成的管中,通過進入室內的光線照射,在檢測器中收集出經樣品所吸收的光線進行測量。
4、檢測器:檢測器通常采用光電倍增管(PMT)或者光敏二極管(PSD)等器件來測量樣品的信號強度。
5、計算機:計算機用于輸入、處理和輸出數據。通常,計算機可以控制單色器、樣品室等部分的功能,并將檢測器中獲得的數據轉換成數字形式進行分析和處理。
紫外分光光度計廣泛應用于化學、生物化學、藥學、食品、環境保護等領域,通常用于以下應用:
1、物質定性和定量分析。
可以用于鑒定樣品中不同化學元素和官能團。例如,當不同樣品所吸收的波長和吸收率差異存在時,可以通過比對標準譜圖來確定物質的種類。對于已知物質,可以通過測量吸收率來計算其濃度。
2、合成過程監控。
可以用于監測化合物的合成過程。通過不斷檢測反應的UV吸光度,可以了解化合物的濃度變化情況。
3、純度檢測。
可以用來檢測樣品的純度。通過比對標準譜圖,可以確定樣品中其他雜質的含量,并確保所測量的樣品不受到其他雜質的干擾。
4、生物分子分析。
可以用于檢測蛋白質、核酸和多糖等生物分子。通常是通過測量吸收光譜中的A280來確定生物分子的濃度,從而用于研究其結構和功能。
紫外分光光度計*的分析原理和檢測技術,可以為科研和工業應用提供出色的分析手段,為人類的健康與發展做出積極的貢獻。